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豬偽狂犬病病毒野毒株檢測試劑盒說明書

產品型號:

廠商性質:生產廠家

訪問量:986

更新時間:2020-06-12

簡要描述:

訂購流程:豬偽狂犬病病毒野毒株檢測試劑盒

電話或通過在線客服咨詢產品→確定產品→提供單位收貨信息→確立合同→安排發(fā)貨。

1.報價含普票、運費。
2.進口原裝產品要3-6周的貨期,詳細情況請咨詢客服。
3.訂貨時間為工作日每周一至周五17:00之前。
4.如因單位財務制度原因,可申請先發(fā)貨,報賬后付款(此條款僅限醫(yī)院、學校信譽良好的 客戶)。

詳細說明:

產品名稱:豬偽狂犬病病毒野毒株檢測試劑盒說明書


規(guī)    格: 50T
檢測方法: 實時熒光 PCR

保存方式: 2~8

  期: 1

    地: 中國

    途: 僅用于科研實驗

訂購流程豬偽狂犬病病毒野毒株檢測試劑盒

電話或通過在線客服咨詢產品確定產品提供單位收貨信息確立合同安排發(fā)貨。

 1.報價含普票、運費。
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 4.如因單位財務制度原因,可申請先發(fā)貨,報賬后付款(此條款僅限醫(yī)院、學校信譽良好的 客戶)。

1. 樣品處理(樣本處理區(qū))

1.1 樣本前處理

組織:取50mg左右組織用玻璃勻漿器勻漿,勻漿后置入潔凈的1.5ml離心管中;
液體標本:取適量標本13000rpm離心2min,棄上清。
1.2 DNA提取

1) 對上述處理好的標本加入40ul 核酸提取液,100恒溫處理10分鐘,13,000 rpm離心5分鐘,取上清液轉移至新的1.5ml EP管,-20保存;
2. 試劑配制(試劑準備區(qū))

根據(jù)代檢測樣本總數(shù),設所需要的PCR反應管管數(shù)為NN=樣本數(shù)+1

管陰性對照+1管陽性對照),體系配制如下表:

試劑

WSSV 反應液

酶液

用量(樣本數(shù)為N

20μl

1μl

3. 
加樣(樣本處理區(qū))

將步驟1提取的DNA、陽性質控品、陰性質控品各取4μl,加入相應的

反應管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。

4. PCR擴增(核酸擴增區(qū))

4.1 將待檢測反應管置于熒光定量PCR儀反應槽內;

5. 結果分析判定

結果分析條件設定
設置基線(baseline):一般情況下,對ABI 7500、7700等儀器設為6-15cycle,對PE5700設為3-15cycle,MJ Research Option2設為6-12cycle。特殊情況可對基線適當調整。
設置閾值(threshold:以閾值線剛超過陰性對照擴增曲線(無規(guī)則的噪音線)的至高點。
結果判斷
陽性:檢測樣本Ct值小于等于35.0,且曲線有明顯的指數(shù)增長期;
可疑:檢測樣本Ct值大于35.0且小于40.0,重復一次實驗,如果Ct值仍小于40.0,且曲線有明顯的指數(shù)增長期,為陽性,否則為陰性;
陰性:檢測不到樣本Ct值或Ct值為40。
6. 對檢驗結果的解析

實驗室環(huán)境污染,試劑污染,標本交叉污染會出現(xiàn)假陽性結果;試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結果。

7. 質控標準

陰性質控品:擴增曲線無對數(shù)生長期或無Ct值顯示;
陽性質控品:擴增曲線有明顯對數(shù)生長期,且Ct≤32;
以上條件應同時滿足,否則實驗視為無效。
 

 



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