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豬流行性腹瀉抗原試劑盒 檢測方法

產品型號:

廠商性質:生產廠家

訪問量:1060

更新時間:2024-06-24

簡要描述:

豬流行性腹瀉(Porcine Epidemic Diarrhea, PED)病毒抗體檢測試劑盒用于檢測豬血清中的豬流行性腹瀉病毒抗體

詳細說明:

96T/192T  1100/2200

 

豬流行性腹瀉抗體檢測試劑盒

 

 

1 抗原預包被板條 1/2 7 陰性對照 0.8/1.6ml

2 酶結合物 11/22ml 8 陽性對照 0.8/1.6ml

3 10倍濃縮洗滌液 50/100ml 9 血清稀釋板 1/2

4 顯色液 11/22ml 10 封板膜 2/4

5 樣本稀釋液 50/100ml 11 說明書 1

6 終止液 11ml      

 

豬流行性腹瀉(Porcine Epidemic Diarrhea, PED)病毒抗體檢測試劑盒用于檢測豬血清中的豬流行性腹瀉病毒抗體

 

需自備的設備及試劑

1.    微量移液器: 0.5μl-10μl、10μl-100μl、100μl-1000μl。

2.    一次性移液器吸頭。

3.    量筒:500ml。

4.    96孔板酶標儀。

5.    蒸餾水或去離子水。

6.    洗瓶或洗板機。

 

樣品制備

取動物全血,按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血。

 

洗滌液的準備

濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫,如有鹽結晶,搖動使結晶的鹽溶解,然后用蒸餾水或去離子水作10倍稀釋。稀釋好的洗滌液可在4℃存放一周左右。

 

樣品的稀釋

在血清稀釋板中按199的體積比稀釋待檢血清(例如:495μl樣品稀釋液中加5μl待檢血清)。

注意:陰性和陽性對照不用稀釋。取每個樣品后都要更換吸頭,準確記錄每個樣品在板上的位置。每個樣品在加入到包被板微孔前應充分混勻。

 

注意事項

1.    試劑盒使用前各試劑應平衡至室溫,使用前應搖勻,使用后放回2-8℃。

2.    不同品種、不同批號試劑盒的試劑組分不得混用,使用試劑時應防止試劑污染。

3.    底物和終止液對皮膚和眼可能有刺激性,使用時應該注意防護。

4.    TMB(底物B液)不要暴露于強光和避免接觸氧化劑。

5.    檢測板拆封后應避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中,并盡快置于2-8)

6.    所有廢棄物在丟棄之前應合理處理以免污染。

7.    嚴格遵守操作說明可以獲得*的結果。操作過程中移液、定時和洗滌等的全部過程必須準確

8.         血清稀釋板為一次性用品,不得重復使用;血清稀釋板的*容量為300μl/孔。

 

操作步驟

1.    取預包被的檢測板(根據樣品多少,可拆開分次使用),將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中。同時設陰性對照1孔、陽性及對照2孔,取陰性及陽性對照各100μl

分別加入反應孔中。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出)。

2.    蓋上封板膜(可按實際需要自行裁剪),置37℃溫育30分鐘。

3.    小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,使用工作濃度洗滌液每孔加250ul,后甩去孔內液體,以上步驟重復4-6次,*在干凈吸水紙上拍干。

4.    每孔加酶結合物50μl,蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。

5.    小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗滌4-6方法同3。切記*在干凈吸水紙上拍干。

6.    每孔加顯色液100μl,混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色10分鐘。

7.    每孔加終止液50μl,使反應終止,10分鐘內測定結果。

結果判定

用酶標儀于450nm630nm作參比波長)讀取吸光度OD值。

試驗成立的條件是:

陰性對照(NOD<0.15,同時陽性對照(POD值>0.4。

計算方法:

樣品OD值÷陽性對照OD均值=S/P

陰陽性判斷:

S/P值≥0.35判斷為陽性;

S/P<0.35判斷為陰性。

 



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